הטיפול בתאים אוטולוגיים המתהווה באמצעות פלזמה עשירה בטסיות דם (PRP) עשוי למלא תפקיד עזר בתכניות טיפול שונות ברפואה רגנרטיבית.קיים ביקוש עולמי לא מסופק לאסטרטגיות לתיקון רקמות לטיפול בחולים עם מחלות שרירים ושלד (MSK) ומחלות עמוד השדרה, דלקת מפרקים ניוונית (OA) ופצעים מורכבים ועקשניים כרוניים.טיפול ב-PRP מבוסס על העובדה שגורם גדילת טסיות דם (PGF) תומך בריפוי פצעים ובמפל תיקון (דלקת, שגשוג ועיצוב מחדש).מספר ניסוחי PRP שונים הוערכו ממחקרים בבני אדם, במבחנה ובבעלי חיים.עם זאת, ההמלצות של מחקרים חוץ גופיים ובעלי חיים מובילות בדרך כלל לתוצאות קליניות שונות, מכיוון שקשה לתרגם תוצאות מחקר לא קליניות והמלצות שיטה לטיפול קליני אנושי.בשנים האחרונות חלה התקדמות בהבנת הרעיון של טכנולוגיית PRP וסוכנים ביולוגיים, והוצעו הוראות מחקר חדשות ואינדיקציות חדשות.בסקירה זו, נדון בהתקדמות העדכנית ביותר בהכנה ובהרכב של PRP, כולל מינון טסיות דם, פעילות לויקוציטים וויסות חיסוני מולד ואדפטיבי, אפקט 5-hydroxytryptamine (5-HT) ושיכוך כאב.בנוסף, דנו במנגנון PRP הקשור לדלקת ואנגיוגנזה במהלך תיקון והתחדשות רקמות.לבסוף, נסקור את ההשפעות של כמה תרופות על פעילות PRP.
פלזמה עשירה בטסיות עצמית (PRP) היא החלק הנוזלי בדם היקפי עצמי לאחר הטיפול, וריכוז הטסיות גבוה מקו הבסיס.טיפול ב-PRP נמצא בשימוש עבור אינדיקציות שונות כבר יותר מ-30 שנה, וכתוצאה מכך התעניינות רבה בפוטנציאל של PRP אוטוגני ברפואה רגנרטיבית.המונח ביולוגי אורטופדי הוצג לאחרונה לטיפול במחלות שרירים ושלד (MSK), והשיג תוצאות מבטיחות ביכולת ההתחדשות של תערובות ביו-אקטיביות הטרוגניות של תאי PRP.כיום, טיפול ב-PRP הוא אפשרות טיפול מתאימה עם יתרונות קליניים, והתוצאות המדווחות של המטופלים מעודדות.עם זאת, חוסר העקביות של תוצאות המטופלים ותובנות חדשות הציבו אתגרים לביצוע היישום הקליני של PRP.אחת הסיבות עשויה להיות המספר והשונות של מערכות PRP ו-PRP בשוק.מכשירים אלה שונים מבחינת נפח איסוף PRP וסכמת ההכנה, וכתוצאה מכך מאפייני PRP ייחודיים וסוכנים ביולוגיים.בנוסף, היעדר הסכמה על הסטנדרטיזציה של ערכת הכנת PRP והדו"ח המלא של גורמים ביולוגיים ביישום קליני הובילו לתוצאות דו"חות לא עקביות.נעשו ניסיונות רבים לאפיין ולסווג PRP או מוצרים שמקורם בדם ביישומי רפואה רגנרטיבית.בנוסף, הוצעו נגזרות של טסיות דם, כגון ליזטים של טסיות דם אנושיות, למחקר אורטופדי ותאי גזע במבחנה.
אחת ההערות הראשונות על PRP פורסמה בשנת 2006. המוקד העיקרי של סקירה זו הוא התפקוד ואופן הפעולה של טסיות הדם, השפעת ה-PRP על כל שלב של מפל הריפוי ותפקיד הליבה של גורם הגדילה שמקורו בטסיות דם בהתוויות PRP שונות.בשלב המוקדם של מחקר ה-PRP, העניין העיקרי ב-PRP או PRP-ג'ל היה הקיום והתפקודים הספציפיים של מספר גורמי גדילת טסיות (PGF).
במאמר זה, נדון בהרחבה בפיתוח האחרון של מבנים שונים של חלקיקי PRP ושל קולטני קרום תאי טסיות דם והשפעותיהם על ויסות מערכת החיסון המולדת והסתגלנית.בנוסף, יידונו בהרחבה תפקידם של תאים בודדים שעשויים להתקיים בבקבוקון הטיפול ב-PRP והשפעתם על תהליך התחדשות הרקמות.בנוסף, תתואר ההתקדמות האחרונה בהבנת חומרים ביולוגיים של PRP, מינון טסיות דם, השפעות ספציפיות של תאי דם לבנים ספציפיים והשפעות של ריכוז PGF וציטוקינים על ההשפעות התזונתיות של תאי גזע מזנכימליים (MSCs), כולל PRP מיקוד שונים סביבות תאים ורקמות לאחר העברת אותות התא והשפעות פאראקריניות.באופן דומה, נדון במנגנון ה-PRP הקשור לדלקת ואנגיוגנזה במהלך תיקון והתחדשות רקמות.לבסוף, נסקור את ההשפעה המשככת כאבים של PRP, השפעתן של תרופות מסוימות על פעילות ה-PRP והשילוב של PRP ותוכניות שיקום.
עקרונות בסיסיים של טיפול קליני בפלזמה עשירה בטסיות דם
תכשירי PRP יותר ויותר פופולריים ונפוצים במגוון תחומים רפואיים.העיקרון המדעי הבסיסי של טיפול ב-PRP הוא שהזרקת טסיות דם מרוכזות במקום הפגוע עשויה ליזום תיקון רקמות, סינתזה של רקמת חיבור חדשה ושיקום מחזור הדם על ידי שחרור גורמים פעילים ביולוגית רבים (גורמי גדילה, ציטוקינים, ליזוזומים) ו חלבוני הדבקה האחראים על התחלת תגובת המפל ההמוסטטית.בנוסף, חלבוני פלזמה (למשל פיברינוגן, פרוטרומבין ופיברונקטין) נמצאים ברכיבי פלזמה עניים בטסיות דם (PPPs).תרכיז PRP יכול לעורר שחרור היפרפיזיולוגי של גורמי גדילה כדי להתחיל את הריפוי של פציעה כרונית ולהאיץ את תהליך התיקון של פציעה חריפה.בכל שלבי תהליך תיקון הרקמה, מגוון גורמי גדילה, ציטוקינים ומווסת פעולה מקומית מקדמים את רוב תפקודי התא הבסיסיים באמצעות מנגנונים אנדוקריניים, פאראקריניים, אוטוקריניים ואנדוקריניים.היתרונות העיקריים של PRP כוללים את הבטיחות שלו ואת טכנולוגיית ההכנה הגאונית של ציוד מסחרי עכשווי, שניתן להשתמש בו להכנת חומרים ביולוגיים שניתן להשתמש בהם באופן נרחב.והכי חשוב, בהשוואה לקורטיקוסטרואידים נפוצים, PRP הוא מוצר אוטוגני ללא תופעות לוואי ידועות.עם זאת, אין רגולציה ברורה על הנוסחה וההרכב של הרכב PRP להזרקה, ולהרכב ה-PRP יש שינויים גדולים בטסיות הדם, תכולת תאי דם לבנים (WBC), זיהום תאי דם אדומים (RBC) וריכוז PGF.
טרמינולוגיה וסיווג PRP
במשך עשרות שנים, פיתוח מוצרי PRP המשמשים לגירוי תיקון והתחדשות רקמות היה תחום מחקר חשוב של חומרים ביולוגיים ומדעי התרופות.מפל הריפוי של הרקמות כולל משתתפים רבים, כולל טסיות דם וגורמי הגדילה שלהן וגרגירי ציטוקינים, תאי דם לבנים, מטריצת פיברין וציטוקינים סינרגטיים רבים אחרים.בתהליך מפל זה יתרחש תהליך קרישה מורכב, הכולל הפעלת טסיות דם ובעקבותיה צפיפות ו- α- שחרור תכולת חלקיקי הטסיות, אגרגציה של פיברינוגן (משתחרר בטסיות דם או חופשי בפלסמה) לרשת הפיברין, והיווצרות של תסחיף טסיות.
PRP "אוניברסלי" מדמה את תחילת הריפוי
בהתחלה, המונח "פלזמה עשירה בטסיות דם (PRP)" נקרא תרכיז טסיות המשמש ברפואת עירוי דם, והוא נמצא בשימוש עד היום.בתחילה, מוצרי PRP אלו שימשו רק כדבק רקמת פיברין, בעוד בטסיות הדם שימשו רק כדי לתמוך בפילמור פיברין חזק יותר כדי לשפר את איטום הרקמות, במקום כממריץ ריפוי.לאחר מכן, טכנולוגיית PRP תוכננה כדי לדמות את התחלת מפל הריפוי.לאחר מכן, טכנולוגיית ה-PRP סוכמה באמצעות יכולתה להכניס ולשחרר גורמי גדילה לתוך המיקרו-סביבה המקומית.ההתלהבות הזו למתן PGF מסתירה לעתים קרובות את התפקיד החשוב של רכיבים אחרים בנגזרות הדם הללו.התלהבות זו מתעצמת עוד יותר בשל היעדר נתונים מדעיים, אמונות מיסטיות, אינטרסים מסחריים והיעדר סטנדרטיזציה וסיווג.
הביולוגיה של תרכיז PRP מורכבת כמו הדם עצמו, ועשויה להיות מורכבת יותר מתרופות מסורתיות.מוצרי PRP הם חומרים ביולוגיים חיים.התוצאות של יישום PRP קליני תלויות במאפיינים הפנימיים, האוניברסליים והסתגלניים של הדם של המטופל, לרבות רכיבים תאיים שונים אחרים שעשויים להתקיים בדגימת PRP ובמיקרו-סביבה המקומית של הקולטן, שיכולה להיות במצב אקוטי או כרוני.
סיכום של מינוח PRP מבלבל ומערכת סיווג מוצעת
במשך שנים רבות, מתרגלים, מדענים וחברות סובלים מאי ההבנה והפגמים הראשוניים של מוצרי PRP והמונחים השונים שלהם.חלק מהכותבים הגדירו PRP כטסיות בלבד, בעוד שאחרים ציינו ש-PRP מכיל גם תאי דם אדומים, תאי דם לבנים שונים, פיברין וחלבונים ביו-אקטיביים עם ריכוז מוגבר.לכן, סוכני PRP ביולוגיים רבים ושונים הוכנסו לפרקטיקה הקלינית.מאכזב שבדרך כלל אין בספרות תיאור מפורט של גורמים ביולוגיים.הכישלון בתקינה של הכנת המוצר ופיתוח מערכות הסיווג לאחר מכן הובילו לשימוש במספר רב של מוצרי PRP המתוארים במונחים וקיצורים שונים.אין זה מפתיע ששינויים בתכשירי PRP מובילים לתוצאות לא עקביות של המטופל.
קינגסלי השתמש לראשונה במונח "פלזמה עשירה בטסיות דם" בשנת 1954. שנים רבות לאחר מכן, Ehrenfest et al.הוצעה מערכת הסיווג הראשונה המבוססת על שלושה משתנים עיקריים (תכולת טסיות, לויקוציטים ופיברין), ומוצרי PRP רבים חולקו לארבע קטגוריות: P-PRP, LR-PRP, פיברין טהור עשיר בטסיות דם (P-PRF) ולוקוציטים עשיר PRF (L-PRF).מוצרים אלה מוכנים על ידי מערכת סגורה אוטומטית לחלוטין או פרוטוקול ידני.בינתיים, Everts et al.הודגשה החשיבות של אזכור תאי דם לבנים בתכשירי PRP.הם גם ממליצים להשתמש בטרמינולוגיה מתאימה לציון גרסאות לא פעילות או מופעלות של תכשירי PRP וג'ל טסיות.
דלונג וחב'.הציע מערכת סיווג PRP הנקראת טסיות דם, תאי דם לבנים פעילים (PAW) המבוססת על המספר המוחלט של טסיות הדם, כולל ארבעה טווחי ריכוז של טסיות דם.פרמטרים נוספים כוללים שימוש במפעילי טסיות דם ונוכחות או היעדר תאי דם לבנים (כלומר נויטרופילים).מישרא ואח'.מוצעת מערכת סיווג דומה.כמה שנים מאוחר יותר, מאוטנר ועמיתיו תיארו מערכת סיווג משוכללת ומפורטת יותר (PLRA).המחבר הוכיח שחשוב לתאר את ספירת הטסיות המוחלטת, תכולת תאי דם לבנים (חיובי או שלילי), אחוז נויטרופילים, RBC (חיובי או שלילי) והאם נעשה שימוש בהפעלה אקסוגנית.בשנת 2016, מגלון וחב'.פורסם סיווג DEPA המבוסס על מינון הזרקת הטסיות, יעילות הייצור, טוהר ה-PRP שהושג ותהליך ההפעלה.לאחר מכן, לאנה ועמיתיה הציגו את מערכת הסיווג MARSPILL, המתמקדת בתאים חד-גרעיניים בדם היקפיים.לאחרונה, ועדת התקינה המדעית דגלה בשימוש במערכת הסיווג של האגודה הבינלאומית לפקקת והמוסטזיס, המבוססת על שורה של המלצות קונצנזוס לסטנדרטיזציה של השימוש במוצרי טסיות ביישומים של רפואה רגנרטיבית, לרבות מוצרי טסיות קפואים ומופשרים.
בהתבסס על מערכת סיווג ה-PRP המוצעת על ידי מתרגלים וחוקרים שונים, ניסיונות כושלים רבים לתקנן את הייצור, ההגדרה והנוסחה של PRP לשימוש רופאים יכולים להסיק מסקנה הוגנת, מה שסביר שלא יקרה בשנים הקרובות. , הטכנולוגיה של מוצרי PRP קליניים ממשיכה להתפתח, ונתונים מדעיים מראים כי יש צורך בתכשירי PRP שונים כדי לטפל בפתולוגיות שונות בתנאים ספציפיים.לכן, אנו מצפים שהפרמטרים והמשתנים של ייצור PRP אידיאלי ימשיכו לגדול בעתיד.
שיטת הכנת PRP בעיצומה
על פי מינוח PRP ותיאור המוצר, משוחררות מספר מערכות סיווג עבור ניסוחי PRP שונים.למרבה הצער, אין הסכמה לגבי מערכת הסיווג המקיפה של PRP או כל דם עצמי ומוצרי דם אחרים.באופן אידיאלי, מערכת הסיווג צריכה לשים לב למאפייני PRP שונים, הגדרות ומינוח מתאים הקשורים להחלטות הטיפול של חולים עם מחלות ספציפיות.כיום, יישומים אורטופדיים מחלקים את ה-PRP לשלוש קטגוריות: פיברין טהור עשיר בטסיות דם (P-PRF), PRP עשיר בליקוציטים (LR-PRP) ו-PRP חסרי לויקוציטים (LP-PRP).למרות שהוא ספציפי יותר מההגדרה הכללית של מוצר PRP, קטגוריות LR-PRP ו-LP-PRP חסרות כמובן כל ספציפיות בתכולת תאי הדם הלבנים.בשל מנגנוני ההגנה החיסונית והמארח שלו, תאי דם לבנים השפיעו מאוד על הביולוגיה הפנימית של מחלות רקמה כרוניות.לכן, סוכנים ביולוגיים של PRP המכילים תאי דם לבנים ספציפיים יכולים לקדם משמעותית ויסות חיסוני ותיקון והתחדשות רקמות.ליתר דיוק, לימפוציטים נמצאים בשפע ב-PRP, מייצרים גורם גדילה דמוי אינסולין ותומכים בעיצוב רקמות מחדש.
מונוציטים ומקרופאגים ממלאים תפקיד מפתח בתהליך הוויסות החיסוני ומנגנון תיקון הרקמות.החשיבות של נויטרופילים ב-PRP אינה ברורה.LP-PRP נקבע כהכנת PRP הראשונה על ידי הערכה שיטתית להשגת תוצאות טיפול יעילות של OA מפרק.עם זאת, לאנה ואחרים.השימוש ב-LP-PRP בטיפול ב-OA בברך מתנגד, מה שמעיד על כך שתאי דם לבנים ספציפיים ממלאים תפקיד חשוב בתהליך הדלקתי לפני התחדשות הרקמות, מכיוון שהם משחררים מולקולות פרו-דלקתיות ואנטי-דלקתיות.הם מצאו שלשילוב של נויטרופילים וטסיות פעילים היו השפעות חיוביות יותר מאשר השפעות שליליות על תיקון רקמות.הם גם ציינו כי הפלסטיות של מונוציטים חשובה לתפקוד הלא דלקתי והתיקון בתיקון רקמות.
הדו"ח של ערכת הכנת PRP במחקר קליני הוא מאוד לא עקבי.רוב המחקרים שפורסמו לא הציעו את שיטת הכנת ה-PRP הנדרשת לחזרה של התוכנית.אין הסכמה ברורה בין התוויות הטיפול, ולכן קשה להשוות בין מוצרי PRP לבין תוצאות הטיפול הקשורות אליהם.ברוב המקרים המדווחים, טיפול בריכוז טסיות מסווג תחת המונח "PRP", אפילו עבור אותה התוויה קלינית.עבור כמה תחומים רפואיים (כגון OA וטנדינוזיס), חלה התקדמות בהבנת השינויים של תכשירי PRP, דרכי לידה, תפקוד טסיות דם ורכיבי PRP אחרים המשפיעים על תיקון רקמות והתחדשות רקמות.עם זאת, דרוש מחקר נוסף כדי להגיע להסכמה על המינוח של PRP הקשור לסוכנים ביולוגיים של PRP על מנת לטפל באופן מלא ובטוח בפתולוגיות ומחלות מסוימות.
מצב מערכת סיווג PRP
השימוש בביותרפיה עצמית של PRP מוטרד מההטרוגניות של תכשירי PRP, שמות לא עקביים וסטנדרטיזציה לקויה של הנחיות מבוססות ראיות (כלומר, ישנן שיטות הכנה רבות לייצור בקבוקוני טיפול קליני).ניתן לחזות שתכולת ה-PRP המוחלטת, הטוהר והמאפיינים הביולוגיים של PRP ומוצרים נלווים משתנים מאוד, ומשפיעים על היעילות הביולוגית ותוצאות הניסויים הקליניים.הבחירה במכשיר להכנת PRP מציגה את משתנה המפתח הראשון.ברפואה רגנרטיבית קלינית, מתרגלים יכולים להשתמש בשני ציוד ושיטות שונות להכנת PRP.תכשיר משתמש במפריד תאי דם סטנדרטי, הפועל על הדם המלא שנאסף בעצמו.שיטה זו משתמשת בטכנולוגיית הפרדת תוף או דיסק בזרימה רציפה ובשלבי צנטריפוגה קשים ורכים.רוב המכשירים הללו משמשים בניתוח.שיטה נוספת היא שימוש בטכנולוגיה ובציוד צנטריפוגלי כבידה.צנטריפוגה בכוח G גבוה משמשת להפרדת השכבה הצהובה של ESR מיחידת הדם המכילה טסיות דם ותאי דם לבנים.התקני ריכוז אלו קטנים יותר ממפרידי תאי דם וניתן להשתמש בהם לצד המיטה.בהפרש ģ - כוח וצנטריפוגה מובילים להבדלים משמעותיים בתפוקה, בריכוז, בטוהר, בכדאיות ובמצב המופעל של טסיות דם מבודדות.ניתן להשתמש בסוגים רבים של ציוד מסחרי להכנת PRP בקטגוריה האחרונה, וכתוצאה מכך שינויים נוספים בתכולת המוצר.
חוסר הקונצנזוס על שיטת ההכנה ותיקוף של PRP ממשיך להוביל לחוסר עקביות של טיפול PRP, ויש הבדלים עצומים בהכנת PRP, באיכות הדגימה ובתוצאות הקליניות.ציוד ה-PRP המסחרי הקיים אומת ונרשם על פי מפרט היצרן הקנייני, מה שפותר את המשתנים השונים בין ציוד ה-PRP הקיים כיום.
הבן את מינון הטסיות במבחנה ובאינבו
ההשפעה הטיפולית של PRP ושל תרכיזי טסיות אחרים נובעת משחרור של גורמים שונים המעורבים בתיקון ושיקום רקמות.לאחר הפעלת הטסיות, טסיות הדם יווצרו פקקת טסיות, שתשמש כמטריקס חוץ-תאי זמני לקידום שגשוג והתמיינות תאים.לכן, הוגן להניח שמינון גבוה יותר של טסיות יוביל לריכוז מקומי גבוה יותר של גורמים ביו-אקטיביים של טסיות.עם זאת, המתאם בין המינון והריכוז של טסיות הדם לבין ריכוז גורם הגדילה הביו-אקטיבי של הטסיות המשוחררות והתרופה עשוי להיות בלתי נשלט, מכיוון שיש הבדלים משמעותיים בספירת הטסיות הבסיסית בין חולים בודדים, ויש הבדלים בין שיטות הכנת PRP.באופן דומה, מספר גורמי גדילת טסיות המעורבים במנגנון תיקון הרקמות נמצאים בחלק הפלזמה של PRP (לדוגמה, גורם גדילה בכבד וגורם גדילה דמוי אינסולין 1).לכן, מינון גבוה יותר של טסיות לא ישפיע על פוטנציאל התיקון של גורמי גדילה אלו.
מחקר PRP במבחנה פופולרי מאוד מכיוון שניתן לשלוט במדויק על הפרמטרים השונים במחקרים אלו ולהשיג את התוצאות במהירות.מספר מחקרים הראו שתאים מגיבים ל-PRP באופן תלוי מינון.Nguyen ו-Pham הראו כי ריכוזים גבוהים מאוד של GF לא בהכרח תורמים לתהליך של גירוי תאים, מה שעשוי להיות לא מועיל.כמה מחקרים במבחנה הראו שלריכוזים גבוהים של PGF עשויים להיות השפעות שליליות.סיבה אחת עשויה להיות המספר המוגבל של קולטני ממברנת התא.לכן, ברגע שרמת ה-PGF גבוהה מדי בהשוואה לקולטנים הזמינים, תהיה להם השפעה שלילית על תפקוד התא.
המשמעות של נתוני ריכוז הטסיות במבחנה
למרות שלמחקר במבחנה יש יתרונות רבים, יש לו גם כמה חסרונות.במבחנה, בשל האינטראקציה המתמשכת בין סוגי תאים רבים ושונים בכל רקמה בשל מבנה הרקמה ורקמה התאית, קשה לשכפל במבחנה בסביבת תרבית יחידה דו-ממדית.צפיפות התאים שיכולה להשפיע על מסלול האות של התא היא בדרך כלל פחות מ-1% ממצב הרקמה.רקמת צלחת תרבות דו-ממדית מונעת מהתאים להיחשף למטריצה חוץ-תאית (ECM).בנוסף, טכנולוגיית התרבית האופיינית תוביל להצטברות של פסולת תאים ולצריכה מתמשכת של חומרים מזינים.לכן, תרבית חוץ גופית שונה מכל מצב יציב, אספקת חמצן לרקמות או החלפה פתאומית של מצע תרבית, ופורסמו תוצאות סותרות, המשוות את ההשפעה הקלינית של PRP עם מחקר חוץ-גופני של תאים, סוגי רקמות וטסיות ספציפיים. ריכוזים.גרציאני ואחרים.נמצא כי במבחנה, ההשפעה הגדולה ביותר על התפשטות אוסטאובלסטים ופיברובלסטים הושגה בריכוז טסיות PRP גבוה פי 2.5 מערך הבסיס.לעומת זאת, הנתונים הקליניים שסיפקו Park ועמיתיו הראו כי לאחר איחוי עמוד השדרה, יש להעלות את רמת טסיות ה-PRP ביותר מפי 5 מהקו הבסיס כדי לגרום לתוצאות חיוביות.תוצאות סותרות דומות דווחו גם בין נתוני התפשטות הגידים במבחנה לבין התוצאות הקליניות.
(התוכן של מאמר זה מודפס מחדש, ואיננו מספקים כל ערבות מפורשת או משתמעת לדיוק, מהימנות או שלמות התוכן הכלול במאמר זה, ואיננו אחראים לדעות של מאמר זה, אנא הבינו.)
זמן פרסום: מרץ-01-2023